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Accueil > Productions scientifiques > Thèses et Habilitations > Soutenance de thèse - 14.06.2011 14:00

Soutenance de thèse - 14.06.2011 14:00

par Guillaume Mériguet - 7 juin 2011

Bruno Teste soutiendra sa thèse intitulée :

Développement d’un microsystème bioanalytique intégrant des
nanoparticules magnétiques dédié au diagnostic de l’allergie

le 14 Juin à 14h à l’ESPCI en amphi Joliot (Bâtiment N, 2e étage)

Résumé

Dans le cadre du diagnostic de l’allergie, l’approche in vitro la plus
utilisée consiste à quantifier les Immunoglobulines E (IgE) du patient par
un immunodosage de type enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) à l’aide
d’un support conventionnel : la plaque de microtitration. Ces méthodes
sont utilisées du fait de leur grande spécificité et sensibilité. Bien que
cette technique soit facile à mettre en œuvre et automatisable, elle
nécessite des volumes de réactifs et d’échantillons importants (de l’ordre
de la centaine de µL) et est limitée par le transfert de masse des
analytes vers la surface du support générant ainsi des temps d’analyse
élevés. Notre travail a consisté à élaborer un microsystème bioanalytique
intégrant des nanoparticules magnétiques et dédié au diagnostic de
l’allergie au lait. Les nanoparticules magnétiques fonctionnalisées avec
la molécule de capture, l’antigène dans notre cas, sont utilisées en tant
que support de l’interaction et permettent ainsi de capturer la cible
(IgE) en phase colloïdale. La réduction de la taille du support vers des
échelles nanométriques permet d’augmenter le rapport surface sur volume et
de réduire les distances de diffusion. Ainsi, la cinétique d’interaction
entre la molécule de capture et la cible est accélérée par rapport à des
supports milli ou micrométriques. Après l’étape de capture de la molécule
cible, les nanoparticules et donc la cible sont séparées des molécules
interférentes et préconcentrées au sein d’une chambre magnétique avant
l’étape de détection. En effet, cette chambre magnétique, composée de
billes de fer ferromagnétiques, permet le confinement magnétique des
nanoparticules. Ainsi, le microsystème que nous avons développé a permis
de diminuer les temps d’analyse d’un facteur 25 et de consommer 50 fois
moins d’échantillon par rapport à un ELISA conventionnel réalisé en plaque
de microtitration. Ceci est d’autant plus critique que l’on travaille dans
un contexte d’allergie au lait qui concerne les jeunes enfants.
L’immunodosage des IgE spécifiques au sein des sérums de patients
allergiques au lait et la comparaison des résultats avec une méthode de
référence a permis de valider ce microsystème bioanalytique en tant
qu’outil de diagnostic de l’allergie.